干粉培养基使用过程中常见问题

干粉培养基使用过程中常见问题

1、容器洁净度的影响
*洗涤剂中含有表面活性剂，会影响微生物生长。
*自来水中的某些离子成分可能会导致培养基出现沉淀。
*其他影响：例如影响观察荧光
2、配制培养基用水的要求
* 去离子水或蒸馏水
*pH值：5.5-7.5
*水质不合格的影响
   ※异常沉淀：如EC肉汤（水质偏酸会产生胆酸盐沉淀）。
   ※ 颜色异常：如SS琼脂、TCBS琼脂。
   ※含琼脂培养基凝胶强度下降。
N/T 0330-2010（ISO 7218）、SN/T 1538.1-2005 (ISO 11133-1)均不推荐使用“超净机”制备的水，而是推荐“蒸馏水”，单蒸水即可.
3、常用加热煮沸方式的比较
 *直接用电炉加热：耗时且含琼脂培养基容易烧糊
*隔水煮沸的弊端
※温度不够，达不到灭菌效果。
※经隔水煮沸的含琼脂培养基，在水浴的过程中易出现分层现象，这是由目前国产琼脂的现状所决定的。
 *为您提供一种快速便捷的方式
※ 第一步：采用微波炉适当加热
※ 第二步：在电炉上继续加热至沸腾
4、灭菌效果监测的重要性和常用方法
*可能引发的问题
※灭菌不彻底
※ 同一灭菌锅内不同位置灭菌条件不均，导致同一批高压
的培养基颜色不一致，如BGLB、EE肉汤等
* 常用监测方法
※ 化学指示卡：使用方便
高压后可立即得知监测结果
※ 生物指示剂：准确性高
生物指示剂产品链接：http://www.xmmc17.com/chanpin/wswhc/cyhc/mj/61.html
5、含琼脂培养基水浴及复溶的要求
* 建议水浴温度在50℃左右，时间不宜超过4h。
*如果不能在4h内及时使用，应迅速冷却，使其凝固，使用前再进行复溶。
* 不可反复复溶，否则会影响培养基的pH值和凝胶强度。
6、导致颜色差异的原因
*干粉颜色差异
※由指示剂的批间差异造成的培养基干粉在允许范围内的颜色差异，以微生物质控指标为准。
※产品变质：如SC增菌液干粉变红，说明亚硒酸盐已被氧化，不能使用，建议冷藏保存。
*溶液及平板颜色差异
※正常差异：指示剂的批间差异造成的
※某些含有酸碱指示剂的培养基，其pH值是一个范围，在这个范围内，颜色略有差异也是正常现象。
※非正常差异：pH值异常导致的，可能是培养基或配制用水的pH值异常。
7、导致不正常沉淀的原因
* 培养基变质：过期失效、吸潮
* 容器不洁净
* 配制用水的问题（见常见问题2）
* 没有完全溶解
* 过度加热
8、导致pH值异常的原因
* 培养基变质：过期、吸潮
* 容器不洁净
* 配制用水的问题（见常见问题2）
* 没有完全溶解
* 过度加热
* 反复复溶（见常见问题5）
9、导致凝胶强度下降的原因
* 没有充分混匀
* 过度加热
* 反复复溶（见常见问题5）
* pH值偏低
10、培养基保存的注意事项
*培养基的保存条件：避光保存于阴凉干燥处，使用后，拧紧瓶盖，避免吸潮、氧化或污染。
* 保质期：一般未开封的培养基可保质３年，已开封的可保质半年。开封后应注明开封日期。