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食品中致病菌恒温扩增荧光法LAMP法快速检测试剂

  • 发布时间:2020-03-24
  • 发布者: admin
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食品中致病菌LAMP法快速检测试剂

SN/T 2754-2011出口食品中致病菌环介导恒温扩增(LAMP)检测方法试剂盒
 
一、环介导恒温扩增技术(LAMP)荧光法原理 
       环介导恒温扩增技术(LAMP)荧光法,利用两对特殊引物和具有链置换活性的Bst DNA聚合酶,使模板两端引物结合处循环出现环状单链结构,引物顺利与模板结合并进行链置换扩增反应,实现在恒温条件下(60-65℃)进行连续快速扩增。反应体系中加入了显色指示剂,阴阳性结果显色差异显著,扩增结束后可以通过观察荧光显色剂的颜色变化判读结果,无需开盖避免了扩增产物交叉感染性的可能性。LAMP是一种新型的恒温核酸扩增技术,该技术无需常规PCR中变性、退火、延伸等步骤不同温度设计要求,只需提供一个适宜的恒定温度即可,因此,与常规PCR相比,LAMP技术更适合现场高通量快速检测,具有简单、快速、特异性强的特点。
 
二、应用范围

 
      恒温扩增荧光法检测技术可运用于快速检测食品中的沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌、单核增生李斯特菌、副溶血弧菌、大肠杆菌O157:H7、阪崎肠杆菌、小肠结肠耶尔森氏菌、铜绿假单胞菌、粪肠球菌、产气荚膜梭菌,溶藻弧菌,创伤弧菌。
应用于食品快速检测有两种方式:
1、快速筛查。对食品样品快速增菌后,直接采用基因检测试剂盒来快速筛查有没可疑致病菌(对大多数致病菌在13小时内即可完成筛查);
2、快速鉴定。对食品样品进行增菌,平板分离,使用基因检测试剂盒对可疑菌落进行快速准确的鉴定(1小时内完成鉴定)。

三、食品中致病菌恒温扩增荧光法LAMP法快速检测试剂操作流程
      食品或者水样(过滤集菌)--液体培养基增菌(8-12h)--取1mL增菌液低速离心收集菌体--裂解菌体释放DNA,高速离心收集DNA模板--LAMP快速扩增--结果判读。

四、食品中致病菌恒温扩增荧光法LAMP法快速检测试剂相关标准
SN/T 2754-2011出口食品中致病菌环介导恒温扩增(LAMP)检测方法系列
第1部分:金黄色葡萄球菌
第2部分:大肠杆菌O157
第3部分:志贺氏菌
第4部分:单核细胞增生李斯特菌
第5部分:副溶血性弧菌;
第6部分:小肠结肠炎耶尔森氏菌;
第7部分:空肠弯曲菌;
第8部分:肺炎克雷伯氏菌;
第9部分:溶血性链球菌;
第10部分:产气荚膜梭菌;
第11部分:产霍乱毒素的霍乱弧菌;
第12部分:溶藻弧菌;
第13部分:创伤弧菌;
第14部分:假结核耶尔森氏菌;
第15部分:阪崎肠杆菌。
五、LAMP 试剂品种


 
六、食品中致病菌恒温扩增荧光法LAMP法快速检测试剂可能需要的配套试剂

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